1935年,日本帝国主义加紧侵略华北,民族矛盾上升为主要矛盾。中国共产党确定了抗日民族统一战线的策略原则,呼吁国民党停止内战,一致抗日,再度合作。1936年12月在西安事变中,中国共产党坚持和平解决的方针,迫使蒋介石停止内战,联共抗日。1937年7月7日,日寇发动全面侵华战争。15日,中共中央将《中国共产党为公布国共合作宣言》递交国民党中央,提出三项政治主张,作为国共合作的总纲领和全国人民奋斗的目标。9月22日,国民党公开发表《中国共产党为公布国共合作宣言》。次日,蒋介石发表了实际上承认中国共产党合法地位的谈话,实现了国共两党第二次合作。中国共产党坚持抗日民族统一战线中的独立自主原则,指挥八路军和新四军挺进华北、华中敌后,建立抗日根据地,开辟敌后战场,并积极配合国民党军队正面战场的作战。1938年10月武汉失守后,国民党亲日派汪精卫投敌,充当汉奸。蒋介石推行与共产党边合作、边摩擦的政策,从1939年12月至1943年9月,先后发动三次反共高潮。同时,也组织了一系列抵抗日军进攻的作战。中国共产党提出了坚持抗战,反对投降,坚持团结、反对分裂,坚持进步、反对倒退的三大政治口号;在反摩擦斗争中实行有理、有利、有节的原则;粉碎了国民党顽固派掀起的反共高潮,领导全国人民发展和壮大抗日力量,取得了抗日战争的伟大胜利。抗日战争胜利后,国民党反动派在准备发动内战的同时,邀请毛泽东等赴重庆谈判。在中国共产党的努力下,国共双方签署了《双十协定》,并达成了停战协定,召开了有民主党派和爱国人士参加的政治协商会议。1946年6月底,蒋介石发动全面内战,国共第二次合作结束。