指保持微生物 (实际指菌株)的生活力和原有性状的 技能。优良的菌种如果保藏不好,会引 起衰退和死亡,或者污染杂菌,给教 学、生产、科研带来严重损失。菌种保 藏技能是微生物实验的基础内容,是 生物教师应掌握的技能之一。菌种保 藏方法有斜面低温保藏法、液体石蜡 保藏法、砂土保藏和冷冻保藏法等。
        运用菌种保藏技能的操作方法和 要求是:①斜面低温保藏。将菌种接种 在营养丰富的固体培养基上。培养基 成分要求:20%马铃薯煮出液1000毫 升、葡萄糖30克、KH₂pO₄3克、维生 素B₁10毫克、MgSO₄1.5克、琼脂20 克。分装试管,灭菌后稍冷放成斜面, 在无菌条件下接入所要保藏的菌种。 待菌充分生长后,将试管的棉塞部分 用油纸包扎好,移至2—8℃冰箱中保 藏。保藏时间依生物的种类而不同。霉 菌、放线菌及芽孢菌保存2—4个月, 移种一次。酵母菌两个月移种一次,细 菌最好每个月移种一次。使用斜面低 温保藏必须注意:此法容易使菌株变 异,因为培养基的理化特性不是严格 恒定的,会使微生物的代谢改变,从而 影响微生物的性状,若菌种是经常使 用,而且条件不变,可以采用此法。② 液体石蜡保藏。又称矿油保藏。是在要 保藏的斜面试管菌种培养物上盖上一 层灭过菌的液体石蜡,以杜绝空气。液 体石蜡要高出斜面的一厘米左右,注 入石蜡后的试管放在试管架上在4— 15℃的温度下保藏即可。若储于冰箱, 可使菌种保持较长的存活时间。运用 此法必须注意,要选择干燥场所保藏, 保藏期间要定期检查,培养基露出液 面时,要及时补充灭菌的液体石蜡。③ 砂土保藏。在灭过菌的砂土中接种细 菌的芽孢、放线菌或真菌的孢子悬液, 经真空干燥后,放在室温或冰箱中较 长时间保存。运用此法必须注意:砂土 要选择不含草根、杂物等有损保藏质 量的物质,砂土的pH适宜中性,经60 —80目筛子筛过,砂与土的比例在2 :1—4:1之间。灭菌后要经无菌检 验合格才可使用。④真空冷冻干燥保 藏。是把所要保藏的微生物细胞悬浮 在盛有脱脂牛乳等液体的安瓿瓶中, 冷却结冰后,在零下20℃左右低温下 抽成真空,使之呈干燥状态,密封后在 低温下长期保存。此法特点,是低温、 干燥、真空,使微生物生命活动呈休眠 状态,能较长时间保藏菌种。